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益母草

別名茺蔚、坤草，是一種草本植物。性微寒，味苦辛，可去瘀生新，活血調經 ，利尿消腫，是歷代醫家用來治療婦科疾病之要藥。

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  據現代臨床及動物實施證明，益母草浸膏及煎劑對子宮有強而持久的興奮作用，不但能增強其收力，同時能提高其緊張度和收縮率。益母草全草含益母草堿(Leonurine)約0.05％(花初期含微量，花中期逐漸增高)，水蘇堿(stachydrine)，蘆丁(rutin)，延胡索酸(反丁烯二酸fumaric acid)，益母草堿甲和益母草堿乙。細葉益母草全草含生物堿0.05％。

從化學結構上看，鹽酸益母草堿和鹽酸水蘇堿由于含有較多的極性基團(-OH、-NH2、-COOH)和孤對電子，水溶性特別強，因此普通的C18反相色譜柱已不能滿足此類化合物的分析要求，重要的原因即親水性成分在C18柱上沒有保留。

                                                                      鹽酸益母草堿 結構式                                   鹽酸水蘇堿 結構式

推薦：艾杰爾Venusil stachydrine色譜柱，首支進入《中國藥典》2010 年版的國產親水作用色譜柱

艾杰爾Venusil stachydrine色譜柱

鹽酸水蘇堿專項色譜柱專為分析益母草中鹽酸水蘇堿而設計。該產品是以硅膠為基質，鍵合相由于采用了中性的酰胺基團，在親水作用色譜模式下對強極性、水溶性堿性有機化合物有很好的選擇性。

??HILIC是一種親水作用色譜模式，其洗脫是以化合物親水性/極性增加的次序排列，提高流動相中有機相的比例會增加溶質的保留，典型的流動相是乙腈（40%--97%）/水（或揮發性緩沖鹽），同時它可以使用更高揮發性的流動相或緩沖鹽，方便了與質譜檢測器和蒸發光檢測器的聯用。

益母草中鹽酸水蘇堿分析及圖譜

參照2015版中國藥典一部益母草含量測定項下的色譜條件：
以丙基酰胺鍵合硅膠為填充劑

以乙腈-0.2%冰醋酸溶液（80:20）為流動相，蒸發光散射檢測器檢測。要求理論塔板數以鹽酸水蘇堿計算應不低于6000。

色譜柱：Venusil stachdrine
規格：5μm，4.6*250mm 
訂貨號：VH952505-LH
流動相：乙腈︰0.2%   冰醋酸溶液=80︰20（v/v）
流速：0.5 mL/min
柱溫：20°C
檢測器：ELSD（蒸發光散射檢測器）
進樣量：10μL 

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注：如需訂購，請在化工平臺網上搜索廈門廣晟達儀器設備有限公司，進行選型訂購。

結論：

本實驗采用鍵合有丙基酰胺固定相的水蘇堿專柱Venusil stachdrine，根據2015版中國藥典一部益母草含量測定項下的色譜條件，色譜柱保留效果良好，理論塔板數以鹽酸水蘇堿計算為15203>6000，能夠滿足檢測要求。

色譜柱：Venusil stachdrine使用和?維護

防護

在連接和使用色譜柱時要注意安全，佩戴手套、口罩和防護鏡，任何原因（管路連接不緊、管路老化、PEEK頭老化）導致的溶劑和樣品泄露直接接觸到操作人員，都會對操作人員的健康產生影響。

使用方向

色譜柱在使用過程中要保持流動相方向和色譜柱標示的箭頭方向一致，如無特殊情況，不建議反向使用（如為清洗色譜柱前柱頭的污染物時，可考慮低流速反向沖洗）

活化

新的鹽酸水蘇堿專柱出廠時柱體中的液相為乙腈，在儲存和運輸過程中柱體可能會出現短暫干涸，故新柱*使用前需使用大于20倍柱體積的乙腈以0.5mL/min的流速進行活化后再選擇實驗所需的操作條件進行平衡，如果實驗所需的流動相中含緩沖液，需使用與流動相等比例的有機相和水進行過渡，避免出現鹽析現象。

樣品前處理

為了避免樣品或流動相中的微粒雜質對色譜柱前篩板造成堵塞，實驗所用的所有試劑和樣品在使用前都應使用0.45μm或0.22μm的微孔濾膜進行過濾。對于基質較復雜的樣品，推薦使用SPE固相萃取系統進行前處理。

流動相和樣品pH

為了使色譜柱獲得更佳的壽命和效果，請遵循廠家建議的pH范圍內使用，鹽酸水蘇堿專柱pH適用范圍為2.0-6.0，pH過高會使硅膠溶解，pH過低會導致部分或全部的鍵合相脫落，出現柱性能下降，造成實驗結果不重現。

流動相和樣品溶劑

應避免流動相在高有機相體系下使用與有機相不互溶的磷酸鹽或其他緩沖鹽，避免由于鹽析損壞色譜柱。為不干擾HILIC分離機制，不要使用三氟二酸和其他離子對試劑。如果可能，請盡量選擇流動相溶解樣品，不要使用水或DMSO溶解樣品，避免出現溶劑效應導致的峰型變差。

柱溫和壓力

最大操作溫度應低于60℃，長期在高溫下使用（＞60℃）會損壞色譜柱，這種情況在Ph>6.0時表現明顯。色譜柱可承受400Bar的壓力，但長期處于高壓狀態會影響色譜柱的性能和使用壽命，正常操作使用時建議柱壓應低于200Bar。

保護柱

在進行基質較復雜的樣品分析時，為使色譜柱獲得更好的壽命，建議在色譜柱前使用保護柱，阻擋系統中的微粒和延緩樣品對固定相的化學污染。

沖洗程序

色譜柱使用完畢后需依次使用50%乙腈、5%乙腈、100%乙腈以0.5mL/min沖洗至少20倍柱體積，如果柱前有連接保護柱，需與色譜柱斷開分別進行沖洗。

儲存

儲存色譜柱時，不要有水或緩沖液留在色譜柱中，可使用乙腈作為色譜柱的封存溶劑。長期不用的色譜柱為了防止柱床干涸，建議定期對色譜柱進行沖洗，沖洗完畢用堵頭塞緊色譜柱的兩