HypersilODS2高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。
1、柱壓過高
可能是微粒堵塞.柱床膨脹,不可逆吸附,細菌生長等造成的。也有可能是系統反壓問題,例如阻尼器堵塞,進樣器堵塞,管路或連接口堵塞。在線過濾器不干凈,壓力傳感器不準確等。
2、柱效低
可能是色譜柱被污染、過濾片部分堵塞、色譜柱內的死體積造成,例如流動相pH值或者組成不合適造成固定相損失。流動相急劇變化造成固定相物理損壞,機械振動造成固定相產生裂縫,柱床收縮或干枯。也有可能是儀器連接的問題,認真檢查進樣器、檢測器、管路、保護柱和在線過濾器等是否連接好,也可能是色譜柱沒有平衡好,進樣量過大等問題。
3、重復性差、不出峰、回收率低
可能是色譜柱被污染,流動相pH值或者組成不合適造成固定相損失,樣品溶劑不同或樣品本身不穩定,固定相極性過強或者流動相極性過弱.或者發生非特異性吸附。也可能梯度實驗時平衡時間不足,溫度波動,流動相組成改變,樣品溶劑不同,樣品穩定性不好,方法的開發不好,緩沖液的酸堿度不合適或者緩沖能力不足。