氨基柱是一款既可以正相使用，也可以反相使用，但是我們要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱出廠時保存在正相環境中。

01

用于正相的體系：

1.1 推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積，再根據流動相選用極性相近的二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積，后換成你實驗的流動相。

1.2 正相使用時，不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于還原糖的分析；流動相要*脫氣，并不得含有羰基化合物和過氧化物。

1.3 任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶。

02

用于反相的體系：
2.1 由于新的氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，與反相流動相是不互溶的，因此如果使用反相的方法，必須用至少10倍柱體積的異丙醇沖洗過渡（約2h，0.5mL/min），以除去正相保存溶液。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大，會導致柱壓很高，適當調低流速即可。

2.2 再用至少10倍柱體積95％水-5％乙腈（或甲醇）沖洗（不含緩沖鹽的流動相可省去）過渡，后用流動相平衡。

2.3 用完后洗柱時，必須先用95％水沖洗至少10倍柱體積，除去所用緩沖鹽（不含緩沖鹽的流動相可省去）。然后保存于乙腈/水（80：20）溶液（一個月內）中。長期不用的話，建議用異丙醇保存（一個月以上）。

2.4 新柱子一定要置換掉保存溶液，用異丙醇保存的柱子在使用前也需要花一定的時間給置換掉。

2.5 反相條件下使用時，要特別注意控制pH值范圍（根據你色譜柱耐受使用pH），pH值越低越有發生水解的危險，流動相中水的比例越高當然也越有發生水解的危險。

2.6 還有一種情況是，當使用氨基柱進行酸性物質的分析時，酸性物質的存在意味著質子的存在，可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化，導致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。---------建議用10-15倍的柱體積的為pH=11 NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱（沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨），之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1％。

2.7 柱子再生：以0.5ml/min的流速用30倍柱體積的pH10.0的氨水或氫氧化鈉水溶液沖柱子（注意pH值切不可超過11.0），立即用水（0.5ml/min的流速，30倍柱體積）沖洗，再乙腈/水（80：20）溶液沖洗保存。